叶绿素测定办法 一、 试验原理 叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物安排中并在植物细胞中与蛋白质结组成叶绿体。当植物细胞逝世后叶绿素即游离出来游离叶绿素很不安稳对光、热较灵敏在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素 在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。高等植物中叶绿素有两种叶绿素 a 和 b两者均易溶于乙醇、、丙酮和氯仿。 叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm 和 663nm 处有最大吸收且两吸收曲线nm 处。因而测定提取液在 645nm、663nm、652nm 波长下的吸光值并依据经历公式可别离核算出...

  叶绿素测定办法 一、 试验原理 叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物安排中并在植物细胞中与蛋白质结组成叶绿体。当植物细胞逝世后叶绿素即游离出来游离叶绿素很不安稳对光、热较灵敏在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素 在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。高等植物中叶绿素有两种叶绿素 a 和 b两者均易溶于乙醇、、丙酮和氯仿。 叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm 和 663nm 处有最大吸收且两吸收曲线nm 处。因而测定提取液在 645nm、663nm、652nm 波长下的吸光值并依据经历公式可别离核算出叶绿素 a、叶绿素 b 和总叶绿素的含量。 二、 仪器、和试剂 仪器 分光光度计、电子天平(001g)、研钵、棕色容量瓶容量瓶包锡纸替代、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。 试剂丙酮石英砂碳酸钙粉 三、 操作过程 取新鲜蔬菜 1g洗净吸干水分放入研钵中加少数石英砂和碳酸钙粉及 3mL80丙酮研成均浆再加丙酮 10mL持续研磨至安排变白。暗处静置 35min。 取滤纸 1 张置于漏斗中用丙酮湿润沿玻棒把提取液倒入漏斗滤液流至 50mL 容量瓶中外包锡纸冲刷研钵、研棒及残渣数次最终连同残渣一同倒入漏斗中。 用滴管汲取丙酮将滤纸上的叶绿体色素悉数洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色停止。最终用丙酮定容至 100mL摇匀。 取叶绿体色素提取液在波长 665nm、645nm 下测定吸光度以丙酮为空白对照。 四、 核算 依照试验原理中供给的经历公式别离核算植物资料中叶绿素 a、b 和总叶绿素的含量。 a =12.72A663-2.59A645 b =22.88A663-4.67A645 = a + b =20.29A645+8.05A663 叶绿素含量= *V /m*1000 (mg/g) 叶绿素质量浓度mg/l V提取液体积ml m样品质量g PS:若处理枯燥样品则用 80%丙酮体积分数

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