叶绿素含量测定的试验原理及操作过程
产品简介: 叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物安排中,并在植物细胞中与蛋白质结组成叶绿体。当植物细胞逝世后,叶绿素即游离出来,游离叶绿素很不安稳,对光、热较灵敏;在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素,在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。高等植物中叶绿素有两种:叶绿素a 和b,两者均易溶于乙醇、丙酮和氯仿。 叶绿素的含量测定办法有多种,其间主要有:1.原子吸收光谱法:经过测定镁元素
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叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物安排中,并在植物细胞中与蛋白质结组成叶绿体。当植物细胞逝世后,叶绿素即游离出来,游离叶绿素很不安稳,对光、热较灵敏;在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素,在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。高等植物中叶绿素有两种:叶绿素a 和b,两者均易溶于乙醇、丙酮和氯仿。
叶绿素的含量测定办法有多种,其间主要有:1.原子吸收光谱法:经过测定镁元素的含量,从而直接核算叶绿素的含量。2.分光光度法:使用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值,即可用朗伯—比尔规律核算出提取液中各色素的含量。
叶绿素a和叶绿素b 在645nm 和663nm 处有最大吸收,且两吸收曲线nm 处。因而测定 提取液在645nm、663nm、652nm 波长下的吸光值,并依据经历公式可别离核算出叶绿素a、叶绿素b 和总叶绿素的含量。
仪器 分光光度计、电子顶载天平(感量0.01g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。
取新鲜植物叶片(或其它绿色安排)或干资料,擦净安排外表污物,去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品2g,放入研钵中,加少数石英砂和碳酸钙粉及3mL95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10mL,持续研磨至安排变白。静置3~5min。 取滤纸1张置于漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗,滤液流至100mL 棕色容量瓶中;用少数乙醇冲刷研钵、研棒及残渣数次,最终连同残渣一同倒入漏斗中。 用滴管汲取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素悉数洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色停止。最终用乙醇定容至100mL,摇匀。 取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度,以95%乙醇为空白对照。
依照试验原理中供给的经历公式,别离核算植物资料中叶绿素a、b 和总叶绿素的含量。