依据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，使用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。依据朗伯—比尔规律，某有色溶液的吸光度A与其间溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A＝αCL式中：α份额常数。

  当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。假如溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这便是吸光度的加和性。

  今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并依据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了扫除类胡萝卜素的搅扰，所用单色光的波长挑选叶绿素在红光区的最大吸收峰。

  （二）仪器设备：1. 分光光度计；2. 电子顶载天平（感量0.01g）；3. 研钵；4. 棕色容量瓶；5. 小漏斗；6. 定量滤纸；7. 吸水纸；8. 擦境纸；9. 滴管。

  1. 取新鲜植物叶片（或其它绿色安排）或干资料，擦净安排外表污物，剪碎（去掉中脉），混匀。

  2. 称取剪碎的新鲜样品0.2g，共3份，别离放入研钵中，加少数石英砂和碳酸钙粉及2～3ml95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10ml，持续研磨至安排变白。静置3～5min。

  3. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml棕色容量瓶中，用少数乙醇冲刷研钵、研棒及残渣数次，最终连同残渣一同倒入漏斗中。

  4. 用滴管汲取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素悉数洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色停止。最终用乙醇定容至25ml，摇匀。

  5. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。

  将测定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度（Ca、Cb：mg/L），二者之和为总叶绿素的浓度。最终依据下式可进一步求出植物安排中叶绿素的含量：

  叶绿素的含量（mg/g）= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重（或干重）。

  最近在做transwell预试验，用的Millipore transwell小室，8um孔径，说明书说不必铺胶，每孔10万个细胞，试了不同的培育时刻，用结晶紫或DAPI染色后，发现膜上都没有细胞，只要相似下图中的圆圈，看着也不是细胞，加了因子的试验组圆圈数量要比对照组多。初度做这个试验，不知道是什么原因，恳请高手帮我剖析一下。